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400-6111-883
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Salt Active UltraNuclease GMP-grade 耐高盐全能核酸酶(同Benzonase)
产品货号:20159ES25
产品规格:25 KU
产品价格:¥ 5475
类别:蛋白抽提

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  • 产品信息

     

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    耐高盐全能核酸酶(Salt Active UltraNuclease)同Benzonase Nuclease

    20159ES25

    25 KU

    5475

    20159ES50

    50 KU

    10135

    20159ES60

    100 KU

    18275

    20159ES80

    1 MU (1000 KU)

    询价

    20159ES90

    5 MU (5000 KU)

    询价

     

    产品描述

     

    Salt Active UltraNuclease GMP-grade(耐高盐全能核酸酶同Benzonase Nuclease)是一种来源于海洋微生物重组非特异性核酸内切酶,UltraNuclease相比在0.5M NaCl条件下具有最佳活性,广泛应用于生产工艺流程中,有效去除核酸污染。

    本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)表达纯化,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液粘度提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。

    本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl,5 mM MgCl2500 mM NaCl,50%Glycerol,pH 8.0)中,无色透明液体。

     

    产品性质

     

    来源

    E. coli

    分子量(Molecular Weight)

    24.7 kDa

    等电点

    9.61

    纯度(Purity)

    99%(SDS-PAGE)

    酶活(Enzyme Activity)

    250-300 U/μL

    pH(Optimum pH)

    8.0(工作范围pH 6-10)

    温度(Optimum Temperature)

    37℃(工作范围0-42℃)

    辅助因子(Cofactor)

    1-10 mM Mg2+

    内毒素(Endotoxin)

    < 0.25 EU/1000 U

    储存缓冲液(Storage Buffer)

    20 mM Tris-HCl pH 8.0,5 mM MgCl2500 mM NaCl,50%甘油

    活性单位定义(Unit Definition)

    在37℃,pH 8.0反应条件,在30 min内消化鲱鱼精DNA成为寡核苷酸使A260吸收值变化1.0所用的酶量定义为一个活性单位(U)。

     

    运输和保存方法

     

    冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。

     

    注意事项

     

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

     

    使用方法

     

    1、 样本准备

    贴壁细胞:去除培养基,用PBS细胞,去除上清。

    悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。

    大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。

    2、样品处理

       将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)

    3、酶的添加

    1. 添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成8-9

    2 按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加Salt ActiveUltraNuclease37℃孵育30min以上。也可以自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。

    】耐高盐全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。

    4、上清获取

    12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,进行后续相关实验。

    若溶液偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。

     

    HB220414