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实验耗材
产品规格:25 KU
产品价格:¥ 1125.00
类别:蛋白抽提

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产品信息
产品名称
产品编号
规格
价格
促销价
UltraNuclease(Benzonase Nuclease)全能核酸酶
20157ES25
25 KU
1125.00
1069.00
20157ES50
50 KU
1965.00
1867.00
20157ES60
100 KU
3245.00
3083.00
20157ES80
1 MU (1000 KU)
询价
询价
20157ES90
5 MU (5000 KU)
询价
询价
产品描述
UltraNuclease(Benzonase Nuclease)全能核酸酶,又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
UltraNuclease(Benzonase Nuclease)全能核酸酶经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化并在GMP环境下制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
UltraNuclease(Benzonase Nuclease)全能核酸酶以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
产品性质
来源
E. coli
分子量(Molecular Weight)
26.5 kDa
等电点
6.85
纯度(Purity)
≥ 99%(SDS-PAGE)
酶活(Enzyme Activity)
250-300 U/μL
比活(Specific Activity)
≥ 1.5×106 U/mg蛋白
最适pH(Optimum pH)
8.0(工作范围pH 6-10)
最适温度(Optimum Temperature)
37℃(工作范围0-42℃)
辅助因子(Cofactor)
1-10 mM Mg2+
蛋白酶活性(Protease)
阴性
无菌检查(Sterility)
阴性
内毒素(Endotoxin)
< 0.25 EU/1000 U
宿主蛋白残留(Host protein)
< 10 ppm(μg/mL)
储存缓冲液(Storage Buffer)
20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油
活性单位定义(Unit Definition)
在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2)本产品仅作科研用途!推荐使用条件
条件参数
最佳条件
有效条件
Mg2+
1-5 mM
1-10 mM
pH
8-9
6-10
温度
37℃
0-42℃
DTT
0-100 mM
>0 mM
巯基乙醇
0-100 mM
>0 mM
单价阳离子
0-20 mM
0-150 mM
磷酸根离子
0-10 mM
0-100 mM
在最佳条件下推荐的使用量及处理时间(37℃,2mM Mg2+,pH 8.0)
UltraNuclease核酸酶用量(终浓度)
处理时间
0.25 U/mL
> 10 h
2.5 U/mL
> 4 h
25 U/mL
30 min
使用方法
1、样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
1)添加适量MgCl2将反应体系中的Mg2+ 浓度调整在1-5 mM范围内,将pH调整成8-9。
2)按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease(Benzonase Nuclease)全能核酸酶,37℃孵育30min以上。也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
【注】全能核酸酶的酶活受离子浓度、反应温度及pH等因素的影响,初次使用时建议摸索最适浓度。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
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产品名称
货号
规格
价格
20156ES25
25 KU
418.00
20156ES50
50 KU
768.00
20156ES60
100 KU
1398.00
20125ES25
25 KU
1125.00
20125ES50
50 KU
1965.00
20125ES60
100 KU
3245.00
36701ES96
1 Kit(96 Tests)
7685.00
HB210728