上海 外菜 vx

您好,欢迎来到YEASEN!
400-6111-883
| |
400-6111-883
上海 外菜 vx
如何选择合适的二抗


二抗是什么?


二抗是能和一抗结合的抗体,即抗体的抗体。主要用于检测一抗的存在。一抗特异性结合抗原的,二抗是特异性结合一抗。即一抗的Fc段或Fab片段可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,一抗主要是IgG类免疫球蛋白,因此二抗就是抗IgG抗体。

一抗二抗都是一种可以特异结合别的物质的基团,而且一抗可以至少结合两种其他基团(底物和二抗),如下图是直标一抗。

1.png


二抗的作用


一抗是特异性的结合目标蛋白,一抗需要发光物质或者显色基团标记才能被检测出来,否者一抗和蛋白的结合与否用肉眼是看不出来的。但是一抗往往比较特异每个都标记成本很高,通常会使用标记二抗可以和一抗结合,并带有可以被检测出的标记(如带荧光、放射性、化学发光或显色基团),所以如今的设计一般是二抗带上可检测标记,再来检测一抗,而一抗识别底物。这样,当一抗结合到底物上,就可以通过二抗检测出来。

比如ECL 显色原理:在 ECL 底物中,含有 H2O2 和鲁米诺(及其衍生物),在 HRP(辣根过氧化物酶)的作用下,发出荧光。

2.png

 



二抗使用要点


二抗是由一抗种属(比如兔,小鼠)的某一亚型的免疫球蛋白IgG免疫哺乳动物(一般是免疫山羊、马、驴、骡和豚鼠及小鼠等动物)产生的抗体,因此二抗只结合特定的物种特定亚型的一抗。比如,羊抗小鼠(二抗)会特异性结合小鼠单抗(一抗)而不会结合兔多抗或大鼠单抗,所以二抗和一抗要匹配上。



二抗的耦联标记


实验方法不同,二抗耦联的基团就会不同,通常主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP),荧光基团(FITC、 Rhodamine、PE、Dylight、Alexa Fluor 、cy3等)、生物素、金颗粒、。一般做WB、 ELISA、 IHC等实验都是推荐HRP标记的二抗,IHC推荐生物书标记的二抗,做IF、 FC等都是荧光如Alexa Fluor 488、FITC、PE标记的抗体。


如何选择合适的二抗呢


a.免疫印记(WB)


图片1.png


     

b.免疫组化(IHC/ICC)


图片2.png


c.免疫荧光(IHF/ICF)

图片3.png


d.免疫沉淀免疫共沉淀


1652154598388928.png


特殊二抗

图片5.png


推荐产品信息


标记基团

产品名称

产品编号

 

HRP

Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)

33101ES

Peroxidase AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) 过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33201ES

Peroxidase-Conjugated Goat Anti-Rat IgG (H+L) 过氧化物酶标记山羊抗大鼠IgG(H+L)

33301ES

 

Biotin

Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 生物素标记山羊抗兔IgG(H+L)

33103ES

Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 生物素标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33203ES

Biotin-SP AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) 生物素标记山羊抗大鼠IgG(H+L)

33303ES

Alexa Fluor® 488

Alexa Fluor® 488 AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) Alexa Fluor 488标记山羊抗豚鼠IgG(H+L)

33406ES

Alexa Fluor® 488 AffiniPure Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L) Alexa Fluor® 488标记兔抗鼠IgG(H+L)

33906ES

Alexa Fluor® 488 AffiniPure Donkey Anti-Sheep IgG (H+L) Alexa Fluor ® 488标记驴抗绵羊IgG(H+L)

34906ES

Alexa Fluor® 594

Alexa Fluor® 594AffiniPure Goat Anti-Guinea Pig IgG (H+L) Alexa Fluor 594标记山羊抗豚鼠IgG(H+L)

33412ES

Alexa Fluor® 594 AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) Alexa Fluor ® 594标记兔抗绵羊IgG(H+L)

33812ES

Alexa Fluor ® 594 AffiniPure Donkey Anti-Sheep IgG (H+L) Alexa Fluor ® 594标记驴抗绵羊IgG(H+L)

34912ES

上海 外菜 vxAlexa Fluor ® 647

Alexa Fluor ® 647 AffiniPure Goat Anti- Human IgG (H+L) Alexa Fluor® 647标记山羊抗人IgG(H+L)

33223ES

Alexa Fluor® 647AffiniPure Rabbit Anti-Mouse IgG (H+L) Alexa Fluor® 647标记兔抗鼠IgG(H+L)

33913ES

Alexa Fluor ® 647 AffiniPure Donkey Anti-Rat IgG (H+L) Alexa Fluor ® 647标记驴抗大鼠IgG(H+L)

34413ES

 

 

FITC

FITC-AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) FITC标记兔抗山羊IgG(H+L)

33707ES

FITC-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) FITC标记山羊抗兔IgG(H+L)

33107ES

FITC-AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33207ES

FITC-AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) FITC标记山羊抗大鼠IgG(H+L)

33307ES

FITC-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) FITC标记兔抗绵羊IgG(H+L)

33807ES

 

 

Cy3

Cy3-AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L)

33108ES

Cy3-AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33208ES

Cy3-AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L) Cy3标记山羊抗大鼠IgG(H+L)

33308ES

Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) Cy3标记兔抗山羊IgG(H+L)

33708ES

Cy3-AffiniPure Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L) Cy3标记兔抗绵羊IgG(H+L)

33808ES

 

罗丹明

Rhodamine(TRITC)AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG (H+L) 罗丹明标记山羊抗兔IgG(H+L)

33109ES

Rhodamine(TRITC)AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG (H+L) 罗丹明标记山羊抗小鼠IgG(H+L)

33209ES

Rhodamine(TRITC)AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG (H+L) 罗丹明标记兔抗山羊IgG(H+L)

33709ES

 
文献引用

[1]Zhang B, Wang H, Liao Z, et al. EGFP–EGF1-conjugated nanoparticles for targeting both neovascular and glioma cells in therapy of brain glioma[J]. Biomaterials, 2014, 35(13): 4133-4145. IF: 8.387

[2]Yu X, Wang J, Liu J, et al. A multimodal Pepstatin A peptide-based nanoagent for the molecular imaging of P-glycoprotein in the brains of epilepsy rats[J]. Biomaterials, 2016, 76: 173-186.    IF:8.402

[3]Liu J, He Y, Zhang J, et al. Functionalized nanocarrier combined seizure-specific vector with P-glycoprotein modulation property for antiepileptic drug delivery[J]. Biomaterials, 2016, 74: 64-76. IF:8.402

[4]Ma Y, Ji Y, You M, et al. Labeling and long-term tracking of bone marrow mesenchymal stem cells in vitro using NaYF 4: Yb 3+, Er 3+ upconversion nanoparticles[J]. Acta biomaterialia, 2016, 42: 199-208. IF: 6.638

[5]Wang Y, Lin Y X, Qiao S L, et al. Polymeric nanoparticles enable reversing macrophage in tumor microenvironment for immunotherapy[J]. Biomaterials, 2017, 112(15): 3e163. IF:8.806

[6] Liu C, He X, Liu W, et al. Bi-allelic Mutations in TTC29 Cause Male Subfertility with  Asthenoteratospermia in Humans and Mice[J]. The American Journal of Human Genetics,  2019, 105(6): 1168-1181. 34106ES60  IF:9.924

[7]Xu T, Ding W, Ao X, et al. ARC regulates programmed necrosis and myocardial ischemia/reperfusion injury through the inhibition of mPTP opening[J]. Redox biology, 2019, 20: 414-426.IF(7.126)(Alexa Fluor 488)

[8] Tan T, Wang Y, Wang J, et al. Targeting peptide-decorated biomimetic lipoproteins improve deep penetration and cancer cells accessibility in solid tumor. Acta Pharm Sin B. 2020;10(3):529-545.  Alexa Fluor 488 labeled IgG (H+L)IF: 7.097

[9] A Photoclick Hydrogel for Enhanced Single〤ell Immunoblotting[J]. Advanced Functional Materials, 2020, 30.33112ES60   IF: 16.836

[10] Bingcheng Yi a,b,1, Lei Yuc,1, Han Tanga,et al. Lysine-doped polydopamine coating enhances  antithrombogenicity and endothelialization of an electrospun aligned fifibrous vascular  graft.. Applied Materials Today,2021.   33207ES60  IF:10.041